Production, purification, characterization, immobilization, and application of Serrapeptase: a review

Abstract

BACKGROUND: Serrapeptase is a proteolytic enzyme with many favorable biological properties like anti-inflammatory, analgesic, anti-bacterial, fibrinolytic properties and hence, is widely used in clinical practice for the treatment of many diseases. Although Serrapeptase is widely used, there are very few published papers and the information available about the enzyme is very meagre. Hence this review article compiles all the information about this important enzyme Serrapeptase.

METHODS: A literature search against various databases and search engines like PubMed, SpringerLink, Scopus etc. was performed.

RESULTS: We gathered and highlight all the published information regarding the molecular aspects, properties, sources, production, purification, detection, optimizing yield, immobilization, clinical studies, pharmacology, interaction studies, formulation, dosage and safety of the enzyme Serrapeptase.

CONCLUSION:Serrapeptase is used in many clinical studies against various diseases for its anti-inflammatory, fibrinolytic and analgesic effects. There is insufficient data regarding the safety of the enzyme as a health supplement. Data about the anti-atherosclerotic activity, safety, tolerability, efficacy and mechanism of action of the Serrapeptase are still required.

Key words： Serrapeptase; proteolytic enzyme; anti-inflammatory; fibrinolytic

Acknowledgments

The authors would like to thank SRM University, Chennai, India for supporting and performing the study. SG is obliged to the management of SRM for partial completion of masters in Genetic Engineering.

Compliance with ethics guidelines

E. Selvarajan and Shreya Gopinath declare that they have no conflicts of interest. This manuscript is a review article and does not involve a research protocol requiring approval by the relevant institutional review board or ethics committee.

References

1 Abdou A M (2003). Purification and partial characterization of psychrotrophic Serratia marcescens lipase. J Dairy Sci, 86(1): 127–132

PMID

2 Ahmed H H, Fadl  N N, El- Shamy  K A, Hamza  H A (2014). Miracle enzymes serrapeptase and nattokinase mitigate neuroinflammation and apoptosis associated with Alzheimer’s disease in experimental model. World J Pharm Pharm Sci, 3(2): 876–891

3 Aiyappa P S, Harris  J O (1976). The extracellular metalloprotease of Serratia marcescens: I. Purification and characterization. Mol Cell Biochem, 13(2): 95–100

PMID

4 Al-Khateeb T H ,  Nusair Y  (2008). Effect of the proteolytic enzyme serrapeptase on swelling, pain and trismus after surgical extraction of mandibular third molars. Int J Oral Maxillofac Surg, 37(3): 264–268

PMID

5 Aldridge S (2013). Industry backs biocatalysis for greener manufacturing. Nat Biotechnol, 31(2): 95–96

PMID

6 Ambrus J L, Lassman  H B, DeMarchi  J J (1967). Absorption of exogenous and endogenous proteolytic enzymes. Clin Pharmacol Ther, 8(3): 362–368

PMID

7 Ammar M S, El-Ssaway  M, Yassin M ,  Sherif Y M  (1998). Hydrolytic Enzymes of fungi isolated from Certain Egyptian Antiquities objects while utilizing the Industrial Wastes of Sugar and Integrated Industries Company (SIIC). Egypt J Biotechnol, (3): 60–90

8 Anil C S, Kashinath  M A (2013). Production, Characterization and optimization of potent protease (Serratiopeptidase) from SerratiamarcescensE 15. Int Res J Pharm App Sci, 3(4): 95–98

9 Aratani H, Tateishi  H, Negita S  (1980). Studies on the distributions of antibiotics in the oral tissues: Experimental staphylococcal infection in rats, and effect of serratiopeptidase on the distributions of antibiotics (author’s transl). Jpn J Antibiot, 33(5): 623–635

PMID

10 Aso T, Noda  Y, Matsuura S ,  Nishimura T  (1981). Breast engorgement and its treatment: Clinical effects of Danzen an anti-inflammatory enzyme preparation. The world of Obsttrics and Gynecology (Japanese), 33: 371–379

11 Ayswarya A, Ramesh  B, Muthuraman M S  (2013). Optimisation studies in the production and purification of serratiopeptidase from Serratiamarscecens UV mutant SM3. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 5(3): 0975–1491

12 Bach E, Anna  S V, Daroit  D J, Correa  A P F, Segalin  J, Brandelli A  (2012). Production, one-step purification, and characterization of a keratinolytic protease from Serratia marcescens P3. Process Biochem, 47(12): 2455–2462

13 Badhe R V, Nanda  R K, Kulkarni  M B, Bhujabal  M N, Patil  P S, Badhe  S R (2009). Medium optimization studies for Serratiopeptidase production from Serratia marcescens ATCC 13880. Hindustan Antibiotics Bulletin, 51(1–4): 17–23

14 Baumann U (1994). Crystal structure of the 50 kDa metallo protease from Serratia marcescens. J Mol Biol, 242(3): 244–251

PMID

15 Bellussi L, Ciferri  G, De S E ,  Passali D  (1984). Effect of 2-(alpha-thenoylthio)propionyl-glycine in treatment of secretory otitis media. CurrTher Res, 36(3): 596–605

16 Bhagat S, Agarwal  M, Roy V  (2013). Serratiopeptidase: a systematic review of the existing evidence. Int J Surg, 11(3): 209–217

PMID

17 Bi F, Zhang  J, Su Y ,  Tang Y C ,  Liu J N  (2009). Chemical conjugation of urokinase to magnetic nanoparticles for targeted thrombolysis. Biomaterials, 30(28): 5125–5130

PMID

18 Bodhankar M M ,  Agnihotri V V ,  Bhushan S B  (2011). Feasibility, formulation and characterization of innovative microparticles for oral delivery of peptide drug. Int J Res Pharm Chem, 1(3): 630–636

19 Bracale G, Selvetella  L (1996). Clinical study of the efficacy of and tolerance to seaprose S in inflammatory venous disease. Controlled study versus serratio-peptidase. Minerva Cardioangiol, 44(10): 515–524

PMID

20 Braunagel S C ,  Benedik M J  (1990). The metalloprotease gene of Serratia marcescens strain SM6. Mol Gen Genet, 222(2-3): 446–451

PMID

21 Cech T R, Bass  B L (1986). Biological catalysis by RNA. Annu Rev Biochem, 55(1): 599–629

PMID

22 Celik M M, Kavvasoglu  G, Celik E ,  Bulgurcu M  (2013). Serratiopeptidase Induced Hemorrhage in a Patient with Behçet’s Disease. International Journal of Basic and Clinical Studies, 1(1): 190–196

23 Chen Y, Zhang  Y (2011). Fluorescent quantification of amino groups on silica nanoparticle surfaces. Anal Bioanal Chem, 399(7): 2503–2509

PMID

24 Chopra D, Rehan  H S, Mehra  P, Kakkar A K  (2009). A randomized, double-blind, placebo-controlled study comparing the efficacy and safety of paracetamol, serratiopeptidase, ibuprofen and betamethasone using the dental impaction pain model. Int J Oral Maxillofac Surg, 38(4): 350–355

PMID

25 Decedue C J, Broussard  E A 2nd, Larson  A D, Braymer  H D (1979). Purification and characterization of the extracellular proteinase of Serratia marcescens. Biochim Biophys Acta, 569(2): 293–301

PMID

26 Devi C S, Joseph  R E, Saravanan  H, Naine S J ,  Srinivansan V M  (2013). Screening and molecular characterization of Serratia marcescens VITSD2: A strain producing optimum serratiopeptidase. Front Biol, 8(6): 632–639

27 Dhanvijay P, Misra  A K, Varma  S K (2013). Diclofenac induced acute renal failure in a decompensated elderly patient. J Pharmacol Pharmacother, 4(2): 155–157

PMID

28 Dohmen K, Matsunaga  K, Irie K ,  Shirahama M ,  Onohara S ,  Miyamoto Y ,  Takeshita T ,  Ishibashi H  (1998). Granulomatous hepatitis induced by saridon and serrapeptase. Hepatol Res, 11(2): 133–137

29 El-Hamid H S, Ahmed  H A, Sadek  K M, El-Bestawy  A R, Ellakany  H F (2014). Impact of Serratiopeptidase treatment on performance and health parameters in broiler chicken. Int J Pharm Sci Rev Res, 26(2): 84–90

30 Esch P M, Gerngross  H, Fabian A  (1989). Reduction of postoperative swelling. Objective measurement of swelling of the upper ankle joint in treatment with serrapeptase-- a prospective study. Fortschr Med, 107(4): 67–68, 71–72

PMID

31 Fadl N N, Ahmed  H H, Booles  H F, Sayed  A H (2013). Serrapeptase and nattokinase intervention for relieving Alzheimer’s disease pathophysiology in rat model. Hum Exp Toxicol, 32(7): 721–735

PMID

32 Garg R, Aslam  A, Garg A ,  Walia R  (2012). A prospective comparative study of serratiopeptidase and aceclofenac in upper and lower limb soft tissue trauma cases. Int J PharmacolPhamaceutTechnol, 1(2): 11–16

33 Gerber N N (1975). Prodigiosin-like pigments. CRC Crit Rev Microbiol, 3(4): 469–485

PMID

34 Gurung N, Ray  S, Bose S ,  Rai V (2013). A broader view: microbial enzymes and their relevance in industries, medicine, and beyond. BioMed Res Int, 2013: 329121

PMID

35 Guyton A (1974). Function of the Human Body. WB Saunders, 4:8384

36 Hamada K, Hata  Y, Katsuya Y ,  Hiramatsu H ,  Fujiwara T ,  Katsube Y  (1996). Crystal structure of Serratia protease, a zinc-dependent proteinase from Serratia sp. E-15, containing a beta-sheet coil motif at 2.0 A resolution. J Biochem, 119(5): 844–851

PMID

37 Illanes A, Cauerhff  A, Wilson L ,  Castro G R  (2012). Recent trends in biocatalysis engineering. Bioresour Technol, 115(1): 48–57

PMID

38 Ishihara Y, Kitamura  S, Takaku F  (1983). Experimental studies on distribution of cefotiam, a new beta-lactam antibiotic, in the lung and trachea of rabbits. II. Combined effects with serratiopeptidase. Jpn J Antibiot, 36(10): 2665–2670

PMID

39 Jadav S P, Patel  N H, Shah  T G, Gajera  M V, Trivedi  H R, Shah  B K (2010). Comparison of anti-inflammatory activity of serratiopeptidase and diclofenac in albino rats. J Pharmacol Pharmacother, 1(2): 116–117

PMID

40 Jayaratne P (1996). Major metalloprotease gene of Serratia marcescens is conserved and provides a molecular typing method to differentiate clinical isolates. J Microbiol Methods, 26(3): 261–269

41 Jickling G C, Zhan  X, Ander B P ,  Turner R J ,  Stamova B ,  Xu H, Tian  Y, Liu D ,  Davis R R ,  Lapchak P A ,  Sharp F R  (2010). Genome response to tissue plasminogen activator in experimental ischemic stroke. BMC Genomics, 11(1): 254

PMID

42 Jordon D L (1929). Red heat in salted hides. J IntSoc Leather Trade Chem, 13: 538–569

43 Juhi K P, Divya  T, Mandev B P  (2015). Development and Validation of Analytical Method for Estimation of Paracetamol, Lornoxicam and Serratiopeptidase in their Combined Dosage Form. J Pharm Sci Bioscientific Res, 5(5): 425–433

44 Kaisheng Y I N ,  Wanzhen F U ,  Lixian H E ,  Shanqun L I ,  Yi S H I ,  Yongying X I A O ,  Hao Y U ,  Zhenjie H A N  (2000). A multicenter randomized double blind and controlled clinical trial of serrapeptase enteric coated tablets as an expectorant. Chinese journal of new Drugs and Clinical Remedies, 15(10): 737–740

45 Kamini N R, Hemchander  C, Geraldine J  (1999). Microbial enzyme technology as an alternative to conventional chemical in leather industry. Curr Sci, 76: 101

46 Kasé Y, Seo  H, Oyama Y ,  Sakata M ,  Tomoda K ,  Takahama K ,  Hitoshi T ,  Okano Y ,  Miyata T  (1982). A new method for evaluating mucolytic expectorant activity and its application. I. Methodology. Arzneimittelforschung, 32(4): 368–373

PMID

47 Kaviyarasi N S ,  Prashantha C N ,  Suryanarayan V V S  (2016). In Silico Analysis Of inhibitor and substrate binding site of serrapeptidase from SerratiamarcescensMTCC 8708. Int J Pharm Pharm Sci, 8(4): 975–1491

48 Kaviyarasi N S ,  Sarkar S ,  Suryanarayan V V S  (2015). Characterization of a Gene Encoding Serrapeptidase from SerratiamarcescensStrain (SRM) MTCC 8708, a Plant Isolate. Int J Curr Microbiol Appl Sci, 4(8): 206–214

49 Kaviyarasi N S ,  Suryanarayan V V S  (2016). Serrapeptidase gene of Serratia marcescens from plant origin expressed by Pichia pastoris has protease activity. Indian Journal of Medical Research and Pharmaceutical Sciences, 3(6): 2349–5340

50 Kee W H, Tan  S L, Lee  V, Salmon Y M  (1989). The treatment of breast engorgement with Serrapeptase (Danzen): a randomised double-blind controlled trial. Singapore Med J, 30(1): 48–54

PMID

51 Klein G, Kullich  W (2000). Short-term treatment of painful osteoarthritis of the knee with oral enzymes: randomised, double blind study versus Diclofenac. Clin Drug Investig, 19(1): 15–23

52 Kloepper J W, Tuzun  S, Liu L ,  Wei G (1993). Plant growth-promoting rhizobacteria as inducers of systemic disease resistance. In: Lumsden RD, Waughn J (eds) Pest management: biologically based technologies, American Chemical Society Books,156–165

53 Koyama A, Mori  J, Tokuda H ,  Waku M, Anno  H, Katayama T ,  Murakami K ,  Komatsu H ,  Hirata M ,  Arai T (1986). [Augmentation by serrapeptase of tissue permeation by cefotiam. Jpn J Antibiot, 39(3): 761–771

PMID

54 Krukemeyer M G ,  Krenn V ,  Jakobs M ,  Wagner W  (2012). Magnetic drug targeting in a rhabdomyosarcoma rat model using magnetite-dextran composite nanoparticle-bound mitoxantrone and 0.6 tesla extracorporeal magnets- sarcoma treatment in progress. J Drug Target, 20(2): 185–193

PMID

55 Kumar S, Jana  A K, Dhamija  I, Singla Y ,  Maiti M  (2013). Preparation, characterization and targeted delivery of serratiopeptidase immobilized on amino-functionalized magnetic nanoparticles. Eur J Pharm Biopharm, 85(3 Pt A 3A): 413–426

PMID

56 Kumar S, Jana  A K, Maiti  M, Dhamija I  (2014). Carbodiimide-mediated immobilization of serratiopeptidase on amino-, carboxyl-functionalized magnetic nanoparticles and characterization for target delivery. J Nanopart Res, 16(2): 2233

57 Kumar S, Mohan  U, Kamble A L ,  Pawar S ,  Banerjee U C  (2010). Cross-linked enzyme aggregates of recombinant Pseudomonas putida nitrilase for enantioselective nitrile hydrolysis. Bioresour Technol, 101(17): 6856–6858

PMID

58 Létoffé S ,  Delepelaire P ,  Wandersman C  (1991). Cloning and expression in Escherichia coli of the Serratia marcescens metalloprotease gene: secretion of the protease from E. coli in the presence of the Erwinia chrysanthemi protease secretion functions. J Bacteriol, 173(7): 2160–2166

PMID

59 Liver Doctor (2013). Serrapeptase Health guide

60 Lowry O H, Rosebrough  N J, Farr  A L, Randall  R J (1951). Protein measurement with the Folin phenol reagent. J Biol Chem, 193(1): 265–275

PMID

61 Majima Y, Inagaki  M, Hirata K ,  Takeuchi K ,  Morishita A ,  Sakakura Y  (1988). The effect of an orally administered proteolytic enzyme on the elasticity and viscosity of nasal mucus. Arch Otorhinolaryngol, 244(6): 355–359

PMID

62 Malshe P C (2000). A preliminary trial of serratiopeptidase in patients with carpal tunnel Syndrome. J Assoc Physicians India, 48(11): 1130

PMID

63 Manal K M (2015). Effect of temperature and mutation on serratiopeptidase secreted from Serratiamarcesence. Journal of Genetic and Environmental Resources Conservation, 3(1): 35–37

64 Matsumoto K, Maeda  H, Takata K ,  Kamata R ,  Okamura R  (1984). Purification and characterization of four proteases from a clinical isolate of Serratia marcescens kums 3958. J Bacteriol, 157(1): 225–232

PMID

65 Mazzone A, Catalani  M, Costanzo M ,  Drusian A ,  Mandoli A ,  Russo S ,  Guarini E ,  Vesperini G  (1990). Evaluation of Serratia peptidase in acute or chronic inflammation of otorhinolaryngology pathology: a multicentre, double-blind, randomized trial versus placebo. J Int Med Res, 18(5): 379–388

PMID

66 Mecikoglu M, Saygi  B, Yildirim Y ,  Karadag-Saygi E ,  Ramadan S S ,  Esemenli T  (2006). The effect of proteolytic enzyme serratiopeptidase in the treatment of experimental implant-related infection. J Bone Joint Surg Am, 88(6): 1208–1214

PMID

67 Metkar S K, Girigoswami  A, Murugesan R ,  Girigoswami K  (2016). In vitro and in vivo insulin amyloid degradation mediated by Serratiopeptidase. Materials Science & Engineering C, 70(2017): 728–735

68 Miyagawa S, Matsumoto  K, Kamata R ,  Okamura R ,  Maeda H  (1991). Spreading of Serratia marcescens in experimental keratitis and growth suppression by chicken egg white ovomacroglobulin. Jpn J Ophthalmol, 35(4): 402–410

PMID

69 Miyata K, Maejima  K, Tomoda K ,  Isono M  (1970). Serratia protease part 1. Purification and general properties of the enzyme. AgrBiolChem, 34(2): 310–318

70 Miyata K, Tomoda  K, Isono M  (1970b). Serratia protease. Part II. Substrate specificity of the enzyme. Agric Biol Chem, 34(10): 1452–1457

71 Miyazaki H, Yanagida  N, Horinouchi S ,  Beppu T  (1990). Specific excretion into the medium of a serine protease from Serratia marcescens. Agric Biol Chem, 54(10): 2763–2765

72 Mohankumar A, Raj  R H K (2011). Production and characterization of Serratiopeptidase enzyme from Serratia marcescens. Int J Biol, 3(3): 39–44

73 Moriya N, Nakata  M, Nakamura M ,  Takaoka M ,  Iwasa S ,  Kato K, Kakinuma  A (1994). Intestinal absorption of serrapeptase (TSP) in rats. Biotechnol Appl Biochem, 20(Pt 1): 101–108

PMID

74 Mundhava S G, Mehta  D S, Thaker  S J (2016). A Comparative Study to Evaluate Anti-Inflammatory and analgesic activity of commonly used Proteolytic Enzymes and their Combination with Diclofenac in Rats. Int J Pharm Sci Res, 7(6): 2615–2619

75 Nagaoka S, Tanaka  M, Tsubura E  (1979). A double blind clinical study on the expectorant effect of Seaprose-S. RinshoHyoka, 7: 205–232 (ClinEval)

76 Nageswara S, Singam  R, Guntuku G  (2016). Design of a low cost fermentation medium for the production of Serratiopeptidase enzyme by a novel Streptomyces sp. World J Pharm Pharm Sci, 5(10): 829–842

77 Nakahama K, Yoshimura  K, Marumoto R ,  Kikuchi M ,  Lee I S ,  Hase T, Matsubara  H (1986). Cloning and sequencing of Serratia protease gene. Nucleic Acids Res, 14(14): 5843–5855

PMID

78 Nakamura S, Hashimoto  Y, Mikami M ,  Yamanaka E ,  Soma T, Hino  M, Azuma A ,  Kudoh S  (2003). Effect of the proteolytic enzyme serrapeptase in patients with chronic airway disease. Respirology, 8(3): 316–320

PMID

79 Namdeo M, Bajpai  S K (2009). Immobilization of a-amylase onto cellulose-coated magnetite (CCM) nanoparticles and preliminary starch degradation study. J MolCatalEnzym, 59: 134–139

80 Nieper H A (2010). “The Curious Man: The Life and Works of Dr. Hans Nieper”. AuthorHouse.

81 Okumura H, Watanabe  R, Kotoura Y ,  Nakane Y ,  Tangiku O  (1977). Effects of a proteolytic-enzyme preparation used concomitantly with an antibiotic in osteoarticular infections (author’s transl). Jpn J Antibiot, 30(3): 223–227

PMID

82 Pakhale S V, Bhagwat  S S (2016). Purification of serratiopeptidase from Serratiamarcescens NRRL B 23112 using ultrasound assisted three phase partitioning. Ultrasonics Sonochemistry, 31: 532–538

83 Panagariya A, Sharma  A K (1999). A preliminary trial of serratiopeptidase in patients with carpal tunnel syndrome. J Assoc Physicians India, 47(12): 1170–1172

PMID

84 Pansuriya R, Singhal  R (2011). Effects of dissolved oxygen and agitation on production of serratiopeptidase by Serratia marcescens NRRL B-23112 in stirred tank bioreactor and its kinetic modeling. J Microbiol Biotechnol, 21(4): 430–437

PMID

85 Pansuriya R C ,  Singhal R S  (2010). Evolutionary operation (EVOP) to optimize whey independent serratiopeptidase production from Serratia marcescens NRRL B-23112. J Microbiol Biotechnol, 20(5): 950–957

PMID

86 Patel J K, Thakkar  D, Patel M B  (2015). Development and Validation of Analytical Method for Estimation of Paracetamol, Lornoxicam and Serratiopeptidase in their Combined Dosage Form. J Pharm Sci Bioscientific Res, 5(5): 425–433

87 Pravin K S, Ravindra  L B, Gaudb  R S, Kiran  N B, Madhugandha  S K (2015). Modulation of serratiopeptidase transdermal patch by lipid-based transfersomes. J Adhes Sci Technol, 29(23): 2622–2633

88 Queiroz B P V ,  Melo I S  (2006). Antagonism of Serratiamarcescens towards Phytophthoraparasitica and its effects in promoting the growth of citrus. Braz J Microbiol, 37(4): 448–450

89 Rajinikanth B, Venkatachalam  V V, Manavalan  R (2014). Investigations on the potential of serratiopeptidase – A proteolytic enzyme, on acetic acid induced ulcerative colitis in mice. Int J Pharm Pharm Sci, 6(5): 525–531

90 Rath G, Johal  E S, Goyal  A K (2011). Development of serratiopeptidase and metronidazole based alginate microspheres for wound healing. Artif Cells Blood Substit Immobil Biotechnol, 39(1): 44–50

PMID

91 Reddy A R, Rajamani  K, Mounika A ,  Reddy G S  (2015). Development and validation of RP-HPLC Method for simulations estimation of paracetamol, aceclofenac and serratiopeptidase in combined tablet dosage form. World J Pharm Pharm Sci, 4(3): 1008–1023

92 Robert S R (2009). The ‘Miracle’ Enzyme is Serrapeptase, the 2nd Gift from Silkworms Giving the answer to Pain, Inflammation and Clear Arteries. Naturally Healthy Publications, 3(4): 12–19

93 Romero F J, Garcia  L A, Salas  J A, Diaz  M, Quiros L M  (2001). Production, purification and partial characterization of two extracellular proteases from Serratia marcescens grown in whey. Process Biochem, 36(6): 507–515

94 Ruell J A, Avdeef  A, Du C ,  Tsinman K  (2002). A Simple PAMPA Filter for Passively Absorbed Compounds. 224th National Meeting of the American Chemical Society.

95 Sabu A (2003). Sources, Properties and Applications of Microbial Therapeutics Enzymes. Indian J Biotechnol, 2(3): 334–341

96 Salamone P R, Wodzinski  R J (1997). Production, purification and characterization of a 50-kDa extracellular metalloprotease from Serratia marcescens. Appl Microbiol Biotechnol, 48(3): 317–324

PMID

97 Salarizadeh N, Hasannia  S, Noghabi K A ,  Sajedi R H  (2014). Purification and Characterization of 50 kDa Extracellular Metalloprotease from Serratia sp. ZF03. Iranian J Biotechnol, 12(3): 18–27

98 Sandhya K V, Devi  S G, Mathew  S T (2008). Quantitation of serrapeptase in formulations by UV method in the microplate format. Curr Drug Deliv, 5(4): 303–305

PMID

99 Sasaki S, Kawanami  R, Motizuki Y ,  Nakahara Y ,  Kawamura T ,  Tanaka A ,  Watanabe S  (2000). Serrapeptase-induced lung injury manifesting as acute eosiniphilic pneumonia. Nihon Kokyuki Gakkai Zasshi, 38(7): 540–544

PMID

100 Selan L, Papa  R, Tilotta M ,  Vrenna G ,  Carpentieri A ,  Amoresano A ,  Pucci P ,  Artini M  (2015). Serratiopeptidase: a well-known metalloprotease with a new non-proteolytic activity against S. aureus biofilm. BMC Microbiol, 15(1): 207

PMID

101 Sellman S (2003). Serrapeptase, An Amazing Gift from The Silk Worm. World rights reserved.

102 Shanks R M, Stella  N A, Hunt  K M, Brothers  K M, Zhang  L, Thibodeau P H  (2015). Identification of SlpB, a Cytotoxic Protease from Serratia marcescens. Infect Immun, 83(7): 2907–2916

PMID

103 Shimura S, Okubo  T, Maeda S ,  Aoki T, Tomioka  M, Shindo Y ,  Takishima T ,  Umeya K  (1983). Effect of expectorants on relaxation behavior of sputum viscoelasticity in vivo. Biorheology, 20(5): 677–683

PMID

104 Singh R, Kumar  M, Mittal A ,  Mehta P K  (2016). Microbial enzymes: industrial progress in 21st century. 3 Biotech, 6(2): 174

105 Stancu M M (2016). Response Mechanisms in Serratia marcescens IBBPo15 During Organic Solvents Exposure. Curr Microbiol, 73(6): 755–765

PMID

106 Subbaiya R, Ayyappadasan  G, Mythili S V ,  Dhivya E ,  Ponmurugan P  (2011). Pilot scale microbial production and optimization of Serratia peptidase from Serratia marcescens. J Ecobiotechnol, 3(12): 10–13

107 Tachibana M, Mizukoshi  O, Harada Y ,  Kawamoto K ,  Nakai Y  (1984). A multi-centre, double-blind study of serrapeptase versus placebo in post-antrotomy buccal swelling. Pharmatherapeutica, 3(8): 526–530

PMID

108 Tao K, Yu  X, Liu Y ,  Shi G, Liu  S, Hou T  (2007). Cloning, expression, and purification of insecticidal protein Pr596 from locust pathogen Serratia marcescens HR-3. Curr Microbiol, 55(3): 228–233

PMID

109 Tripura C, Sashidhar  B, Podile A R  (2007). Ethyl methanesulfonate mutagenesis-enhanced mineral phosphate solubilization by groundnut-associated Serratia marcescens GPS-5. Curr Microbiol, 54(2): 79–84

PMID

110 Tsuyama N, Yoshio  O, Makoto F  (1977). Clinical evaluation on antiswelling drug-A-4700 in orthopaedic field. A comprehensive double blind controlled trial compared with serratiopeptidase and placebo in 20 orthopedic clinics. RinshoHyoka, 5: 535–575 (ClinEval)

111 UmaMaheswari T, Hemalatha  T, Sankaranarayanan P ,  Puvanakrishnan R  (2016). Enzyme therapy: current perspectives. Indian J Exp Biol, 54(1): 7–16

PMID

112 Vanama J, Chintada  H, Guntuku G ,  Tadimalla P  (2014). Application of response surface methodology in medium components optimization to enhance serratiopeptidase production by Streptomyces hydrogenans MGS13. Eur Sci J, 10(12): 1857–7431

113 Verma M L, Barrow  C J, Puri  M (2013). Nanobiotechnology as a novel paradigm for enzyme immobilisation and stabilisation with potential applications in biodiesel production. Appl Microbiol Biotechnol, 97(1): 23–39

PMID

114 Vicari E, La Vignera  S, Battiato C ,  Arancio A  (2005). Treatment with non-steroidal anti-inflammatory drugs in patients with amicrobial chronic prostato-vesiculitis: transrectal ultrasound and seminal findings. Minerva Urol Nefrol, 57(1): 53–59

PMID

115 Viswanatha Swamy A H ,  Patil P A  (2008). Effect of some clinically used proteolytic enzymes on inflammation in rats. Indian J Pharm Sci, 70(1): 114–117

PMID

116 Wagdarikar J M ,  Joshi A M ,  Shaikh A A  (2015). Media Optimization Studies for Enhanced Production of Serratiopeptidase from Bacillus Licheniformis (NCIM 2042). Asian Journal of Biomedical and Pharmacutical Sciences, 5(42): 19–23

117 Woodley J F (1994). Enzymatic barriers for GI peptide and protein delivery. Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, 11(2-3): 61–95

PMID

118 Yu C C, Kuo  Y Y, Liang  C F, Chien  W T, Wu  H T, Chang  T C, Jan  F D, Lin  C C (2012). Site-specific immobilization of enzymes on magnetic nanoparticles and their use in organic synthesis. Bioconjug Chem, 23(4): 714–724

PMID

119 Zhu H, Pan  J, Hu B ,  Yu H L ,  Xu J H  (2009). Immobilization of glycolate oxidase from Medicago falcata on magnetic nanoparticles for application in biosynthesis of glyoxylic acid. J Mol Catal, B Enzym, 61(3–4): 174–179

120 Ziv-Polat O, Topaz  M, Brosh T ,  Margel S  (2010). Enhancement of incisional wound healing by thrombin conjugated iron oxide nanoparticles. Biomaterials, 31(4): 741–747

PMID