Production, purification, characterization, immobilization, and application of Serrapeptase: a review

Abstract

BACKGROUND: Serrapeptase is a proteolytic enzyme with many favorable biological properties like anti-inflammatory, analgesic, anti-bacterial, fibrinolytic properties and hence, is widely used in clinical practice for the treatment of many diseases. Although Serrapeptase is widely used, there are very few published papers and the information available about the enzyme is very meagre. Hence this review article compiles all the information about this important enzyme Serrapeptase.

METHODS: A literature search against various databases and search engines like PubMed, SpringerLink, Scopus etc. was performed.

RESULTS: We gathered and highlight all the published information regarding the molecular aspects, properties, sources, production, purification, detection, optimizing yield, immobilization, clinical studies, pharmacology, interaction studies, formulation, dosage and safety of the enzyme Serrapeptase.

CONCLUSION:Serrapeptase is used in many clinical studies against various diseases for its anti-inflammatory, fibrinolytic and analgesic effects. There is insufficient data regarding the safety of the enzyme as a health supplement. Data about the anti-atherosclerotic activity, safety, tolerability, efficacy and mechanism of action of the Serrapeptase are still required.

Keywords

Serrapeptase / proteolytic enzyme / anti-inflammatory / fibrinolytic

References

[1] Abdou A M (2003). Purification and partial characterization of psychrotrophic Serratia marcescens lipase. J Dairy Sci, 86(1): 127–132

[2] Ahmed H H, Fadl  N N, El- Shamy  K A, Hamza  H A (2014). Miracle enzymes serrapeptase and nattokinase mitigate neuroinflammation and apoptosis associated with Alzheimer’s disease in experimental model. World J Pharm Pharm Sci, 3(2): 876–891

[3] Aiyappa P S, Harris  J O (1976). The extracellular metalloprotease of Serratia marcescens: I. Purification and characterization. Mol Cell Biochem, 13(2): 95–100

[4] Al-Khateeb T H ,  Nusair Y  (2008). Effect of the proteolytic enzyme serrapeptase on swelling, pain and trismus after surgical extraction of mandibular third molars. Int J Oral Maxillofac Surg, 37(3): 264–268

[5] Aldridge S (2013). Industry backs biocatalysis for greener manufacturing. Nat Biotechnol, 31(2): 95–96

[6] Ambrus J L, Lassman  H B, DeMarchi  J J (1967). Absorption of exogenous and endogenous proteolytic enzymes. Clin Pharmacol Ther, 8(3): 362–368

[7] Ammar M S, El-Ssaway  M, Yassin M ,  Sherif Y M  (1998). Hydrolytic Enzymes of fungi isolated from Certain Egyptian Antiquities objects while utilizing the Industrial Wastes of Sugar and Integrated Industries Company (SIIC). Egypt J Biotechnol, (3): 60–90

[8] Anil C S, Kashinath  M A (2013). Production, Characterization and optimization of potent protease (Serratiopeptidase) from SerratiamarcescensE 15. Int Res J Pharm App Sci, 3(4): 95–98

[9] Aratani H, Tateishi  H, Negita S  (1980). Studies on the distributions of antibiotics in the oral tissues: Experimental staphylococcal infection in rats, and effect of serratiopeptidase on the distributions of antibiotics (author’s transl). Jpn J Antibiot, 33(5): 623–635

[10] Aso T, Noda  Y, Matsuura S ,  Nishimura T  (1981). Breast engorgement and its treatment: Clinical effects of Danzen an anti-inflammatory enzyme preparation. The world of Obsttrics and Gynecology (Japanese), 33: 371–379

[11] Ayswarya A, Ramesh  B, Muthuraman M S  (2013). Optimisation studies in the production and purification of serratiopeptidase from Serratiamarscecens UV mutant SM3. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 5(3): 0975–1491

[12] Bach E, Anna  S V, Daroit  D J, Correa  A P F, Segalin  J, Brandelli A  (2012). Production, one-step purification, and characterization of a keratinolytic protease from Serratia marcescens P3. Process Biochem, 47(12): 2455–2462

[13] Badhe R V, Nanda  R K, Kulkarni  M B, Bhujabal  M N, Patil  P S, Badhe  S R (2009). Medium optimization studies for Serratiopeptidase production from Serratia marcescens ATCC 13880. Hindustan Antibiotics Bulletin, 51(1–4): 17–23

[14] Baumann U (1994). Crystal structure of the 50 kDa metallo protease from Serratia marcescens. J Mol Biol, 242(3): 244–251

[15] Bellussi L, Ciferri  G, De S E ,  Passali D  (1984). Effect of 2-(alpha-thenoylthio)propionyl-glycine in treatment of secretory otitis media. CurrTher Res, 36(3): 596–605

[16] Bhagat S, Agarwal  M, Roy V  (2013). Serratiopeptidase: a systematic review of the existing evidence. Int J Surg, 11(3): 209–217

[17] Bi F, Zhang  J, Su Y ,  Tang Y C ,  Liu J N  (2009). Chemical conjugation of urokinase to magnetic nanoparticles for targeted thrombolysis. Biomaterials, 30(28): 5125–5130

[18] Bodhankar M M ,  Agnihotri V V ,  Bhushan S B  (2011). Feasibility, formulation and characterization of innovative microparticles for oral delivery of peptide drug. Int J Res Pharm Chem, 1(3): 630–636

[19] Bracale G, Selvetella  L (1996). Clinical study of the efficacy of and tolerance to seaprose S in inflammatory venous disease. Controlled study versus serratio-peptidase. Minerva Cardioangiol, 44(10): 515–524

[20] Braunagel S C ,  Benedik M J  (1990). The metalloprotease gene of Serratia marcescens strain SM6. Mol Gen Genet, 222(2-3): 446–451

[21] Cech T R, Bass  B L (1986). Biological catalysis by RNA. Annu Rev Biochem, 55(1): 599–629

[22] Celik M M, Kavvasoglu  G, Celik E ,  Bulgurcu M  (2013). Serratiopeptidase Induced Hemorrhage in a Patient with Behçet’s Disease. International Journal of Basic and Clinical Studies, 1(1): 190–196

[23] Chen Y, Zhang  Y (2011). Fluorescent quantification of amino groups on silica nanoparticle surfaces. Anal Bioanal Chem, 399(7): 2503–2509

[24] Chopra D, Rehan  H S, Mehra  P, Kakkar A K  (2009). A randomized, double-blind, placebo-controlled study comparing the efficacy and safety of paracetamol, serratiopeptidase, ibuprofen and betamethasone using the dental impaction pain model. Int J Oral Maxillofac Surg, 38(4): 350–355

[25] Decedue C J, Broussard  E A 2nd, Larson  A D, Braymer  H D (1979). Purification and characterization of the extracellular proteinase of Serratia marcescens. Biochim Biophys Acta, 569(2): 293–301

[26] Devi C S, Joseph  R E, Saravanan  H, Naine S J ,  Srinivansan V M  (2013). Screening and molecular characterization of Serratia marcescens VITSD2: A strain producing optimum serratiopeptidase. Front Biol, 8(6): 632–639

[27] Dhanvijay P, Misra  A K, Varma  S K (2013). Diclofenac induced acute renal failure in a decompensated elderly patient. J Pharmacol Pharmacother, 4(2): 155–157

[28] Dohmen K, Matsunaga  K, Irie K ,  Shirahama M ,  Onohara S ,  Miyamoto Y ,  Takeshita T ,  Ishibashi H  (1998). Granulomatous hepatitis induced by saridon and serrapeptase. Hepatol Res, 11(2): 133–137

[29] El-Hamid H S, Ahmed  H A, Sadek  K M, El-Bestawy  A R, Ellakany  H F (2014). Impact of Serratiopeptidase treatment on performance and health parameters in broiler chicken. Int J Pharm Sci Rev Res, 26(2): 84–90

[30] Esch P M, Gerngross  H, Fabian A  (1989). Reduction of postoperative swelling. Objective measurement of swelling of the upper ankle joint in treatment with serrapeptase-- a prospective study. Fortschr Med, 107(4): 67–68, 71–72

[31] Fadl N N, Ahmed  H H, Booles  H F, Sayed  A H (2013). Serrapeptase and nattokinase intervention for relieving Alzheimer’s disease pathophysiology in rat model. Hum Exp Toxicol, 32(7): 721–735

[32] Garg R, Aslam  A, Garg A ,  Walia R  (2012). A prospective comparative study of serratiopeptidase and aceclofenac in upper and lower limb soft tissue trauma cases. Int J PharmacolPhamaceutTechnol, 1(2): 11–16

[33] Gerber N N (1975). Prodigiosin-like pigments. CRC Crit Rev Microbiol, 3(4): 469–485

[34] Gurung N, Ray  S, Bose S ,  Rai V (2013). A broader view: microbial enzymes and their relevance in industries, medicine, and beyond. BioMed Res Int, 2013: 329121

[35] Guyton A (1974). Function of the Human Body. WB Saunders, 4:8384

[36] Hamada K, Hata  Y, Katsuya Y ,  Hiramatsu H ,  Fujiwara T ,  Katsube Y  (1996). Crystal structure of Serratia protease, a zinc-dependent proteinase from Serratia sp. E-15, containing a beta-sheet coil motif at 2.0 A resolution. J Biochem, 119(5): 844–851

[37] Illanes A, Cauerhff  A, Wilson L ,  Castro G R  (2012). Recent trends in biocatalysis engineering. Bioresour Technol, 115(1): 48–57

[38] Ishihara Y, Kitamura  S, Takaku F  (1983). Experimental studies on distribution of cefotiam, a new beta-lactam antibiotic, in the lung and trachea of rabbits. II. Combined effects with serratiopeptidase. Jpn J Antibiot, 36(10): 2665–2670

[39] Jadav S P, Patel  N H, Shah  T G, Gajera  M V, Trivedi  H R, Shah  B K (2010). Comparison of anti-inflammatory activity of serratiopeptidase and diclofenac in albino rats. J Pharmacol Pharmacother, 1(2): 116–117

[40] Jayaratne P (1996). Major metalloprotease gene of Serratia marcescens is conserved and provides a molecular typing method to differentiate clinical isolates. J Microbiol Methods, 26(3): 261–269

[41] Jickling G C, Zhan  X, Ander B P ,  Turner R J ,  Stamova B ,  Xu H, Tian  Y, Liu D ,  Davis R R ,  Lapchak P A ,  Sharp F R  (2010). Genome response to tissue plasminogen activator in experimental ischemic stroke. BMC Genomics, 11(1): 254

[42] Jordon D L (1929). Red heat in salted hides. J IntSoc Leather Trade Chem, 13: 538–569

[43] Juhi K P, Divya  T, Mandev B P  (2015). Development and Validation of Analytical Method for Estimation of Paracetamol, Lornoxicam and Serratiopeptidase in their Combined Dosage Form. J Pharm Sci Bioscientific Res, 5(5): 425–433

[44] Kaisheng Y I N ,  Wanzhen F U ,  Lixian H E ,  Shanqun L I ,  Yi S H I ,  Yongying X I A O ,  Hao Y U ,  Zhenjie H A N  (2000). A multicenter randomized double blind and controlled clinical trial of serrapeptase enteric coated tablets as an expectorant. Chinese journal of new Drugs and Clinical Remedies, 15(10): 737–740

[45] Kamini N R, Hemchander  C, Geraldine J  (1999). Microbial enzyme technology as an alternative to conventional chemical in leather industry. Curr Sci, 76: 101

[46] Kasé Y, Seo  H, Oyama Y ,  Sakata M ,  Tomoda K ,  Takahama K ,  Hitoshi T ,  Okano Y ,  Miyata T  (1982). A new method for evaluating mucolytic expectorant activity and its application. I. Methodology. Arzneimittelforschung, 32(4): 368–373

[47] Kaviyarasi N S ,  Prashantha C N ,  Suryanarayan V V S  (2016). In Silico Analysis Of inhibitor and substrate binding site of serrapeptidase from SerratiamarcescensMTCC 8708. Int J Pharm Pharm Sci, 8(4): 975–1491

[48] Kaviyarasi N S ,  Sarkar S ,  Suryanarayan V V S  (2015). Characterization of a Gene Encoding Serrapeptidase from SerratiamarcescensStrain (SRM) MTCC 8708, a Plant Isolate. Int J Curr Microbiol Appl Sci, 4(8): 206–214

[49] Kaviyarasi N S ,  Suryanarayan V V S  (2016). Serrapeptidase gene of Serratia marcescens from plant origin expressed by Pichia pastoris has protease activity. Indian Journal of Medical Research and Pharmaceutical Sciences, 3(6): 2349–5340

[50] Kee W H, Tan  S L, Lee  V, Salmon Y M  (1989). The treatment of breast engorgement with Serrapeptase (Danzen): a randomised double-blind controlled trial. Singapore Med J, 30(1): 48–54

[51] Klein G, Kullich  W (2000). Short-term treatment of painful osteoarthritis of the knee with oral enzymes: randomised, double blind study versus Diclofenac. Clin Drug Investig, 19(1): 15–23

[52] Kloepper J W, Tuzun  S, Liu L ,  Wei G (1993). Plant growth-promoting rhizobacteria as inducers of systemic disease resistance. In: Lumsden RD, Waughn J (eds) Pest management: biologically based technologies, American Chemical Society Books,156–165

[53] Koyama A, Mori  J, Tokuda H ,  Waku M, Anno  H, Katayama T ,  Murakami K ,  Komatsu H ,  Hirata M ,  Arai T (1986). [Augmentation by serrapeptase of tissue permeation by cefotiam. Jpn J Antibiot, 39(3): 761–771

[54] Krukemeyer M G ,  Krenn V ,  Jakobs M ,  Wagner W  (2012). Magnetic drug targeting in a rhabdomyosarcoma rat model using magnetite-dextran composite nanoparticle-bound mitoxantrone and 0.6 tesla extracorporeal magnets- sarcoma treatment in progress. J Drug Target, 20(2): 185–193

[55] Kumar S, Jana  A K, Dhamija  I, Singla Y ,  Maiti M  (2013). Preparation, characterization and targeted delivery of serratiopeptidase immobilized on amino-functionalized magnetic nanoparticles. Eur J Pharm Biopharm, 85(3 Pt A 3A): 413–426

[56] Kumar S, Jana  A K, Maiti  M, Dhamija I  (2014). Carbodiimide-mediated immobilization of serratiopeptidase on amino-, carboxyl-functionalized magnetic nanoparticles and characterization for target delivery. J Nanopart Res, 16(2): 2233

[57] Kumar S, Mohan  U, Kamble A L ,  Pawar S ,  Banerjee U C  (2010). Cross-linked enzyme aggregates of recombinant Pseudomonas putida nitrilase for enantioselective nitrile hydrolysis. Bioresour Technol, 101(17): 6856–6858

[58] Létoffé S ,  Delepelaire P ,  Wandersman C  (1991). Cloning and expression in Escherichia coli of the Serratia marcescens metalloprotease gene: secretion of the protease from E. coli in the presence of the Erwinia chrysanthemi protease secretion functions. J Bacteriol, 173(7): 2160–2166

[59] Liver Doctor (2013). Serrapeptase Health guide

[60] Lowry O H, Rosebrough  N J, Farr  A L, Randall  R J (1951). Protein measurement with the Folin phenol reagent. J Biol Chem, 193(1): 265–275

[61] Majima Y, Inagaki  M, Hirata K ,  Takeuchi K ,  Morishita A ,  Sakakura Y  (1988). The effect of an orally administered proteolytic enzyme on the elasticity and viscosity of nasal mucus. Arch Otorhinolaryngol, 244(6): 355–359

[62] Malshe P C (2000). A preliminary trial of serratiopeptidase in patients with carpal tunnel Syndrome. J Assoc Physicians India, 48(11): 1130

[63] Manal K M (2015). Effect of temperature and mutation on serratiopeptidase secreted from Serratiamarcesence. Journal of Genetic and Environmental Resources Conservation, 3(1): 35–37

[64] Matsumoto K, Maeda  H, Takata K ,  Kamata R ,  Okamura R  (1984). Purification and characterization of four proteases from a clinical isolate of Serratia marcescens kums 3958. J Bacteriol, 157(1): 225–232

[65] Mazzone A, Catalani  M, Costanzo M ,  Drusian A ,  Mandoli A ,  Russo S ,  Guarini E ,  Vesperini G  (1990). Evaluation of Serratia peptidase in acute or chronic inflammation of otorhinolaryngology pathology: a multicentre, double-blind, randomized trial versus placebo. J Int Med Res, 18(5): 379–388

[66] Mecikoglu M, Saygi  B, Yildirim Y ,  Karadag-Saygi E ,  Ramadan S S ,  Esemenli T  (2006). The effect of proteolytic enzyme serratiopeptidase in the treatment of experimental implant-related infection. J Bone Joint Surg Am, 88(6): 1208–1214

[67] Metkar S K, Girigoswami  A, Murugesan R ,  Girigoswami K  (2016). In vitro and in vivo insulin amyloid degradation mediated by Serratiopeptidase. Materials Science & Engineering C, 70(2017): 728–735

[68] Miyagawa S, Matsumoto  K, Kamata R ,  Okamura R ,  Maeda H  (1991). Spreading of Serratia marcescens in experimental keratitis and growth suppression by chicken egg white ovomacroglobulin. Jpn J Ophthalmol, 35(4): 402–410

[69] Miyata K, Maejima  K, Tomoda K ,  Isono M  (1970). Serratia protease part 1. Purification and general properties of the enzyme. AgrBiolChem, 34(2): 310–318

[70] Miyata K, Tomoda  K, Isono M  (1970b). Serratia protease. Part II. Substrate specificity of the enzyme. Agric Biol Chem, 34(10): 1452–1457

[71] Miyazaki H, Yanagida  N, Horinouchi S ,  Beppu T  (1990). Specific excretion into the medium of a serine protease from Serratia marcescens. Agric Biol Chem, 54(10): 2763–2765

[72] Mohankumar A, Raj  R H K (2011). Production and characterization of Serratiopeptidase enzyme from Serratia marcescens. Int J Biol, 3(3): 39–44

[73] Moriya N, Nakata  M, Nakamura M ,  Takaoka M ,  Iwasa S ,  Kato K, Kakinuma  A (1994). Intestinal absorption of serrapeptase (TSP) in rats. Biotechnol Appl Biochem, 20(Pt 1): 101–108

[74] Mundhava S G, Mehta  D S, Thaker  S J (2016). A Comparative Study to Evaluate Anti-Inflammatory and analgesic activity of commonly used Proteolytic Enzymes and their Combination with Diclofenac in Rats. Int J Pharm Sci Res, 7(6): 2615–2619

[75] Nagaoka S, Tanaka  M, Tsubura E  (1979). A double blind clinical study on the expectorant effect of Seaprose-S. RinshoHyoka, 7: 205–232 (ClinEval)

[76] Nageswara S, Singam  R, Guntuku G  (2016). Design of a low cost fermentation medium for the production of Serratiopeptidase enzyme by a novel Streptomyces sp. World J Pharm Pharm Sci, 5(10): 829–842

[77] Nakahama K, Yoshimura  K, Marumoto R ,  Kikuchi M ,  Lee I S ,  Hase T, Matsubara  H (1986). Cloning and sequencing of Serratia protease gene. Nucleic Acids Res, 14(14): 5843–5855

[78] Nakamura S, Hashimoto  Y, Mikami M ,  Yamanaka E ,  Soma T, Hino  M, Azuma A ,  Kudoh S  (2003). Effect of the proteolytic enzyme serrapeptase in patients with chronic airway disease. Respirology, 8(3): 316–320

[79] Namdeo M, Bajpai  S K (2009). Immobilization of a-amylase onto cellulose-coated magnetite (CCM) nanoparticles and preliminary starch degradation study. J MolCatalEnzym, 59: 134–139

[80] Nieper H A (2010). “The Curious Man: The Life and Works of Dr. Hans Nieper”. AuthorHouse.

[81] Okumura H, Watanabe  R, Kotoura Y ,  Nakane Y ,  Tangiku O  (1977). Effects of a proteolytic-enzyme preparation used concomitantly with an antibiotic in osteoarticular infections (author’s transl). Jpn J Antibiot, 30(3): 223–227

[82] Pakhale S V, Bhagwat  S S (2016). Purification of serratiopeptidase from Serratiamarcescens NRRL B 23112 using ultrasound assisted three phase partitioning. Ultrasonics Sonochemistry, 31: 532–538

[83] Panagariya A, Sharma  A K (1999). A preliminary trial of serratiopeptidase in patients with carpal tunnel syndrome. J Assoc Physicians India, 47(12): 1170–1172

[84] Pansuriya R, Singhal  R (2011). Effects of dissolved oxygen and agitation on production of serratiopeptidase by Serratia marcescens NRRL B-23112 in stirred tank bioreactor and its kinetic modeling. J Microbiol Biotechnol, 21(4): 430–437

[85] Pansuriya R C ,  Singhal R S  (2010). Evolutionary operation (EVOP) to optimize whey independent serratiopeptidase production from Serratia marcescens NRRL B-23112. J Microbiol Biotechnol, 20(5): 950–957

[86] Patel J K, Thakkar  D, Patel M B  (2015). Development and Validation of Analytical Method for Estimation of Paracetamol, Lornoxicam and Serratiopeptidase in their Combined Dosage Form. J Pharm Sci Bioscientific Res, 5(5): 425–433

[87] Pravin K S, Ravindra  L B, Gaudb  R S, Kiran  N B, Madhugandha  S K (2015). Modulation of serratiopeptidase transdermal patch by lipid-based transfersomes. J Adhes Sci Technol, 29(23): 2622–2633

[88] Queiroz B P V ,  Melo I S  (2006). Antagonism of Serratiamarcescens towards Phytophthoraparasitica and its effects in promoting the growth of citrus. Braz J Microbiol, 37(4): 448–450

[89] Rajinikanth B, Venkatachalam  V V, Manavalan  R (2014). Investigations on the potential of serratiopeptidase – A proteolytic enzyme, on acetic acid induced ulcerative colitis in mice. Int J Pharm Pharm Sci, 6(5): 525–531

[90] Rath G, Johal  E S, Goyal  A K (2011). Development of serratiopeptidase and metronidazole based alginate microspheres for wound healing. Artif Cells Blood Substit Immobil Biotechnol, 39(1): 44–50

[91] Reddy A R, Rajamani  K, Mounika A ,  Reddy G S  (2015). Development and validation of RP-HPLC Method for simulations estimation of paracetamol, aceclofenac and serratiopeptidase in combined tablet dosage form. World J Pharm Pharm Sci, 4(3): 1008–1023

[92] Robert S R (2009). The ‘Miracle’ Enzyme is Serrapeptase, the 2nd Gift from Silkworms Giving the answer to Pain, Inflammation and Clear Arteries. Naturally Healthy Publications, 3(4): 12–19

[93] Romero F J, Garcia  L A, Salas  J A, Diaz  M, Quiros L M  (2001). Production, purification and partial characterization of two extracellular proteases from Serratia marcescens grown in whey. Process Biochem, 36(6): 507–515

[94] Ruell J A, Avdeef  A, Du C ,  Tsinman K  (2002). A Simple PAMPA Filter for Passively Absorbed Compounds. 224th National Meeting of the American Chemical Society.

[95] Sabu A (2003). Sources, Properties and Applications of Microbial Therapeutics Enzymes. Indian J Biotechnol, 2(3): 334–341

[96] Salamone P R, Wodzinski  R J (1997). Production, purification and characterization of a 50-kDa extracellular metalloprotease from Serratia marcescens. Appl Microbiol Biotechnol, 48(3): 317–324

[97] Salarizadeh N, Hasannia  S, Noghabi K A ,  Sajedi R H  (2014). Purification and Characterization of 50 kDa Extracellular Metalloprotease from Serratia sp. ZF03. Iranian J Biotechnol, 12(3): 18–27

[98] Sandhya K V, Devi  S G, Mathew  S T (2008). Quantitation of serrapeptase in formulations by UV method in the microplate format. Curr Drug Deliv, 5(4): 303–305

[99] Sasaki S, Kawanami  R, Motizuki Y ,  Nakahara Y ,  Kawamura T ,  Tanaka A ,  Watanabe S  (2000). Serrapeptase-induced lung injury manifesting as acute eosiniphilic pneumonia. Nihon Kokyuki Gakkai Zasshi, 38(7): 540–544

[100] Selan L, Papa  R, Tilotta M ,  Vrenna G ,  Carpentieri A ,  Amoresano A ,  Pucci P ,  Artini M  (2015). Serratiopeptidase: a well-known metalloprotease with a new non-proteolytic activity against S. aureus biofilm. BMC Microbiol, 15(1): 207

[101] Sellman S (2003). Serrapeptase, An Amazing Gift from The Silk Worm. World rights reserved.

[102] Shanks R M, Stella  N A, Hunt  K M, Brothers  K M, Zhang  L, Thibodeau P H  (2015). Identification of SlpB, a Cytotoxic Protease from Serratia marcescens. Infect Immun, 83(7): 2907–2916

[103] Shimura S, Okubo  T, Maeda S ,  Aoki T, Tomioka  M, Shindo Y ,  Takishima T ,  Umeya K  (1983). Effect of expectorants on relaxation behavior of sputum viscoelasticity in vivo. Biorheology, 20(5): 677–683

[104] Singh R, Kumar  M, Mittal A ,  Mehta P K  (2016). Microbial enzymes: industrial progress in 21st century. 3 Biotech, 6(2): 174

[105] Stancu M M (2016). Response Mechanisms in Serratia marcescens IBBPo15 During Organic Solvents Exposure. Curr Microbiol, 73(6): 755–765

[106] Subbaiya R, Ayyappadasan  G, Mythili S V ,  Dhivya E ,  Ponmurugan P  (2011). Pilot scale microbial production and optimization of Serratia peptidase from Serratia marcescens. J Ecobiotechnol, 3(12): 10–13

[107] Tachibana M, Mizukoshi  O, Harada Y ,  Kawamoto K ,  Nakai Y  (1984). A multi-centre, double-blind study of serrapeptase versus placebo in post-antrotomy buccal swelling. Pharmatherapeutica, 3(8): 526–530

[108] Tao K, Yu  X, Liu Y ,  Shi G, Liu  S, Hou T  (2007). Cloning, expression, and purification of insecticidal protein Pr596 from locust pathogen Serratia marcescens HR-3. Curr Microbiol, 55(3): 228–233

[109] Tripura C, Sashidhar  B, Podile A R  (2007). Ethyl methanesulfonate mutagenesis-enhanced mineral phosphate solubilization by groundnut-associated Serratia marcescens GPS-5. Curr Microbiol, 54(2): 79–84

[110] Tsuyama N, Yoshio  O, Makoto F  (1977). Clinical evaluation on antiswelling drug-A-4700 in orthopaedic field. A comprehensive double blind controlled trial compared with serratiopeptidase and placebo in 20 orthopedic clinics. RinshoHyoka, 5: 535–575 (ClinEval)

[111] UmaMaheswari T, Hemalatha  T, Sankaranarayanan P ,  Puvanakrishnan R  (2016). Enzyme therapy: current perspectives. Indian J Exp Biol, 54(1): 7–16

[112] Vanama J, Chintada  H, Guntuku G ,  Tadimalla P  (2014). Application of response surface methodology in medium components optimization to enhance serratiopeptidase production by Streptomyces hydrogenans MGS13. Eur Sci J, 10(12): 1857–7431

[113] Verma M L, Barrow  C J, Puri  M (2013). Nanobiotechnology as a novel paradigm for enzyme immobilisation and stabilisation with potential applications in biodiesel production. Appl Microbiol Biotechnol, 97(1): 23–39

[114] Vicari E, La Vignera  S, Battiato C ,  Arancio A  (2005). Treatment with non-steroidal anti-inflammatory drugs in patients with amicrobial chronic prostato-vesiculitis: transrectal ultrasound and seminal findings. Minerva Urol Nefrol, 57(1): 53–59

[115] Viswanatha Swamy A H ,  Patil P A  (2008). Effect of some clinically used proteolytic enzymes on inflammation in rats. Indian J Pharm Sci, 70(1): 114–117

[116] Wagdarikar J M ,  Joshi A M ,  Shaikh A A  (2015). Media Optimization Studies for Enhanced Production of Serratiopeptidase from Bacillus Licheniformis (NCIM 2042). Asian Journal of Biomedical and Pharmacutical Sciences, 5(42): 19–23

[117] Woodley J F (1994). Enzymatic barriers for GI peptide and protein delivery. Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, 11(2-3): 61–95

[118] Yu C C, Kuo  Y Y, Liang  C F, Chien  W T, Wu  H T, Chang  T C, Jan  F D, Lin  C C (2012). Site-specific immobilization of enzymes on magnetic nanoparticles and their use in organic synthesis. Bioconjug Chem, 23(4): 714–724

[119] Zhu H, Pan  J, Hu B ,  Yu H L ,  Xu J H  (2009). Immobilization of glycolate oxidase from Medicago falcata on magnetic nanoparticles for application in biosynthesis of glyoxylic acid. J Mol Catal, B Enzym, 61(3–4): 174–179

[120] Ziv-Polat O, Topaz  M, Brosh T ,  Margel S  (2010). Enhancement of incisional wound healing by thrombin conjugated iron oxide nanoparticles. Biomaterials, 31(4): 741–747

RIGHTS & PERMISSIONS

Higher Education Press and Springer-Verlag Berlin Heidelberg