ADVANTAGES AND DISADVANTAGES OF ZINK-ETHANOL-FORMALDEHYDE AS A FIXATIVE FOR IMMUNOCYTO CHEMISTRY AND CONFOCAL LASER MICROSCOPY

Abstract

The paper presents an analysis of authors’ results obtained using fixation of various tissues in zink-ethanol-formaldehyde (ZEF). It was found that fixation in ZEF, in comparison with other methods of fixation, allowed to achieve higher sensitivity of immunocytochemical reaction for a large number of antigens studied and, in many cases, to avoid heat unmasking of antigens. It also provided high resolution of the images obtained using the fluorescent and confocal laser microscopy. However, the studies of antigens with small molecular mass revealed the antigen diffusion from the site of original localization. The data obtained suggest that fixation of a material in ZEF fixative is promising for both immunocytochemical studies, including those using the fluorescent and confocal laser microscopy, and general histological practice.

Keywords

immunocytochemistry / fixation technique / confocal laser microscopy

References

[1] Алексеева О. С., Коржевский Д. Э., Отеллин В. А. и др. Преадаптация гипоксией к азотному наркозу и белки теплового шока в нейронах коры головного мозга при этих состояниях. Докл. РАН, 2009, Т. 425, № 4, с. 553–555.

[2] Григорьев И. П., Василенко М. С., Сухорукова Е. Г. и Коржевский Д. Э. Применение различных антител к тирозингидроксилазе для изучения катехоламинергических систем головного мозга млекопитающих. Морфология, 2010, т. 138, вып. 6, с. 60–63.

[3] Григорьев И. П., Гилерович Е. Г., Петрова Е. С. и др. Катехоламинергические структуры переднего мозга крыс после транзиторной ишемии. Регионарное кровообращение и микроциркуляция, 2012, т. 11, № 2, с. 57–60.

[4] Григорьев И. П., Шкляева М. А., Кирик О. В. и др. Распределение альфа-тубулина в структурах переднего мозга крысы. Морфология, 2013, т. 143, вып. 1, с. 7–10.

[5] Закурина А. Н., Коржевский Д. Э. и Павлова Н. Г. Плацентарная недостаточность — морфофункциональные параллели. Журн. акушерства и женских болезней, 2010, т. 59, № 5, с. 51–55.

[6] Кирик О. В., Власов Т. Д. и Коржевский Д. Э. Маркеры нейральных стволовых клеток нестин и musashi-1 в клетках конечного мозга крысы после транзиторной фокальной ишемии. Морфология, 2012, т. 142, вып. 4, с. 19–24.

[7] Кирик О. В., Ворончихин П. А., Чумасов Е. И. и Коржевский Д. Э. Применение реакции на синаптофизин для выявления нейроэпителиальных телец легкого крысы. В кн.: Бабухинские чтения в Орле, М., Из-во ЗАО «Ретиноиды», 2011, вып. 32, с. 70–71.

[8] Кирик О. В. и Коржевский Д. Э. Виментин в клетках эпендимы и субвентрикулярной пролиферативной зоны конечного мозга крысы. Клеточные технологии в биологии и медицине, 2012, № 4, с. 210–214.

[9] Кирик О. В., Сухорукова Е. Г. и Коржевский Д. Э. Кальцийсвязывающий белок Iba-1/AIF1 в клетках головного мозга крысы. Морфология, 2010, т. 137, вып. 2, с. 5–8.

[10] Колос Е. А. и Коржевский Д. Э. Изучение нейрогенеза в спинномозговых ганглиях крысы с помощью иммуногистохимических маркеров дифференцировки. В кн.: Функциональная межполушарная асимметрия и пластичность мозга. М., Издво ФГБУ НЦН РАМН, 2012, с. 293–296.

[11] Коржевский Д. Э., Григорьев И. П. и Отеллин В. А. Применение обезвоживающих фиксаторов, содержащих соли цинка, в нейрогистологических исследованиях. Морфология, 2006, т. 129, вып. 1, с. 85–86.

[12] Коржевский Д. Э., Драй Р. В. и Костюкевич С. В. Иммуноцитохимический метод выявления EC (энтерохромаффинных)клеток эпителия слизистой оболочки кишки крысы. Морфология, 2008, т. 133, вып. 1, с. 78–81.

[13] Коржевский Д. Э., Кирик О. В. и Безнин Г. В. Метод селективного выявления пролиферирующих клеток в структурах формирующейся нервной системы, основанный на определении фосфорилированного гистона Н3. Морфология, 2012, т. 142, вып. 6, с. 69–72.

[14] Коржевский Д. Э., Кирик О. В. и Гиляров А. В. Клетки головного мозга крысы, содержащие эзрин (цитовиллин). Морфология, 2011, т. 140, вып. 6, с. 86–88.

[15] Коржевский Д. Э., Кирик О. В., Петрова Е. С. и Сухорукова Е. Г. Изучение пролиферации клеток в структурах развивающейся нервной системы. В кн.: Вопросы морфологии XXI века. СПб., Изд-во ДЕАН, 2012, вып. 3, с. 65–69.

[16] Коржевский Д. Э., Кирик О. В., Сухорукова Е. Г. и др. Изучение пространственной организации астроцитов головного мозга при помощи конфокальной лазерной микроскопии. Морфология, 2009, т. 135, вып. 3, с. 76–79.

[17] Коржевский Д. Э., Кирик О. В., Сухорукова Е. Г. и Власов Т. Д. Структурная организация микроглиоцитов стриатума после транзиторной фокальной ишемии. Морфология, 2012, т. 141, вып. 2, с. 28–32.

[18] Коржевский Д. Э., Ленцман М. В., Кирик О. В. и Отеллин В. А. Виментин-иммунопозитивные клетки конечного мозга крысы после экспериментального ишемического инсульта. Морфология, 2007, т. 132, вып. 5, с. 23–27.

[19] Коржевский Д. Э., Отеллин В. А., Григорьев И. П. и др. Иммуноцитохимическое выявление нейрональной NO-синтетазы в клетках головного мозга крысы. Морфология, 2007, т. 132, вып. 4, с. 77–80.

[20] Коржевский Д. Э., Петрова Е. С., Кирик О. В. и Отеллин В. А. Оценка дифференцировки нейронов в эмбриогенезе крысы с использованием иммуноцитохимического выявления даблкортина. Морфология, 2008, т. 133, вып. 4, с. 7–10.

[21] Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. М., Мир, 1969.

[22] Нагорнев В. А., Чумасов Е. И., Коржевский Д. Э. и др. Современные подходы к изучению нервных аппаратов артерий при атеросклерозе и сахарном диабете. Мед. акад. журн., 2010, т. 10, № 3, с. 19–27.

[23] Петрова Е. С. Виментин и глиальный фибриллярный кислый белок в клетках эктопических нейротрансплантатов неокортекса. Морфология, 2011, т. 139, вып. 2, с. 22–26.

[24] Петрова Е. С. Астроглиогенез в гетеротопических аллотрансплантатах эмбрионального неокортекса крыс. Бюл. экспер. биол., 2011, т. 151, № 4, с. 191–195.

[25] Петрова Е. С., Власов Т. Д., Колос Е. А. и Коржевский Д. Э. ГАМК-ергические нейроны стриатума крыс в норме и при ишемическом повреждении. В кн.: Функциональная межполушарная асимметрия и пластичность мозга. М., Изд-во ФГБУ НЦН РАМН, 2012, с. 347–349.

[26] Петрова Е. С., Исаева Е. Н. и Коржевский Д. Э. Иммуногистохимическое исследование дифференцировки диссоциированных клеток эмбрионального спинного мозга и неокортекса крыс в условиях аллотрансплантации в поврежденный нерв. В кн.: Функциональная межполушарная асимметрия и пластичность мозга. М., Изд-во ФГБУ НЦН РАМН, 2012, с. 344–347.

[27] Сухорукова Е. Г., Алексеева О. С., Кирик О. В. и др. Сравнительные аспекты структурной организации астроцитов I слоя коры головного мозга человека и крысы. Журн. эволюц. биохим., 2012, т. 48, № 3, с. 280–286.

[28] Сухорукова Е. Г., Кирик О. В. и Коржевский Д. Э. Применение иммуногистохимического метода для выявления микроглии головного мозга в парафиновых срезах. Бюл. экспер. биол., 2010, т. 149, № 6, с. 709–712.

[29] Чумасов Е. И., Ворончихин П. А. и Коржевский Д. Э. Эфферентная иннервация сосудов и бронхов легкого крысы (иммуногистохимическое исследование). Морфология, 2012, т. 142, вып 4, с. 49–53.

[30] Чумасов Е. И., Петрова Е. С. и Коржевский Д. Э. Иммуноморфологический анализ иннервации хромаффинных клеток параганглиев артерий и сердца млекопитающих. Журн. эволюц. биохим., 2011, т. 47, № 4, с. 325–331.

[31] Beckstead J. H. A simple technique for preservation of fixation-sensitive antigens in paraffin-embedded tissues: addendum. J. Histochem. Cytochem., 1995, v. 43, № 3, p. 345.

[32] Benerini-Gatta L., Cadei M., Balzarini P. et al. Application of alternative fixatives to formalin in diagnostic phatology. Europ. J. histochem., 2012, v. 56, p. 63–70.

RIGHTS & PERMISSIONS

Eco-Vector