A METHOD FOR THE ENHANCEMENT OF IMMUNOFLUORESCENCE USING THE AMPLIFICATION OF AN IMMUNOPEROXIDASE REACTION

Abstract

The study was aimed to develop a simple and efficient method to convert immunoperoxidase reaction into immunofluorescent one. The study showed that the use of fluorochrome-conjugated antibodies against horse radish peroxidase significantly enhanced the intensity of immunofluorescent reaction as compared to Coons’ indirect method, which was confirmed by the data of quantitative evaluation of fluorescence intensity. The developed method of conversion does not require an introduction into the protocol of a variety of additional steps or replacement of the reagents used, thus providing an easy transition from the immunoperoxidase reaction to the immunofluorescent one.

Keywords

immunoperoxidase reaction / immunofluorescence / conversion / amplification

References

[1] Гусельникова В. В., Бекоева С. А., Коржевская В. Ф. и др. Гистохимическая и иммуногистохимическая идентификация тучных клеток миокарда человека // Морфология. 2015. Т. 147, вып. 2. С. 80-86.

[2] Коржевский Д. Э., Кирик О. В., Карпенко М. Н. и др. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии (руководство). СПб.: СпецЛит, 2012.

[3] Коржевский Д. Э., Кирик О. В., Петрова Е. С. и др. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии (руководство) / Под ред. Д. Э. Коржевского. 2-е изд., испр. и доп. СПб.: СпецЛит, 2014.

[4] Коржевский Д. Э., Кирик О. В., Сухорукова Е. Г. и др. Молекулярная морфология. Методы флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии. СПб.: СпецЛит, 2014.

[5] Коржевский Д. Э., Сухорукова Е. Г., Гилерович Е. Г. и др. Преимущества и недостатки цинк-этанол-формальдегида как фиксатора для иммуноцитохимических исследований и конфокальной лазерной микроскопии // Морфология. 2013. Т. 143, вып. 2. С. 81-85.

[6] Сухорукова Е. Г. Ядерный белок NeuN в нейронах черного вещества головного мозга человека // Морфология. 2013. Т. 143, вып. 2. С. 78-80.

[7] Сухорукова Е. Г., Кирик О. В., Зеленкова Н. М., Коржевский Д. Э. Нейрональный ядерный антиген NeuN - показатель сохранности нервной ткани и пригодности ее для иммуногистохимического исследования // Мед. академ. журн. 2015. Т. 15, № 1. С. 63-67.

[8] Alekseeva O. S., Gusel’nikova V. V., Beznin G. V., Korzhevskii D. E. Prospects of the nuclear protein NeuN application as an index of functional state of the vertebrate nerve cells // Zh. EVol. Biokhim. Fiziol. 2015. Vol. 51, № 5. P. 313-323.

[9] Gusel’nikova V. V., Korzhevskiy D. E. NeuN As a Neuronal Nuclear Antigen and Neuron Differentiation Marker // Acta Naturae. 2015. Vol. 7, № 2. P. 42-47.

[10] Ibaraki T., Muramatsu M., Takai S. et al. The relationship of tryptase- and chymase-positive mast cells to angiogenesis in stage I non-small cell lung cancer // Eur. J. Cardiothorac. Surg. 2005. Vol. 28, № 4. P. 617-621.

[11] Ranieri G., Ammendola M., Patruno R. et al. Tryptase-positive mast cells correlate with angiogenesis in early breast cancer patients // Int. J. Oncol. 2009. Vol. 35, № 1. P. 115-120.

[12] Vitte J. Human mast cell tryptase in biology and medicine // Mol. Immunol. 2015. Vol. 63, № 1. P. 18-24.

[13] Wang G., Achim C. L., Hamilton R. L. et al. Tyramide signal amplification method in multiple-label immunofluorescence confocal microscopy // Methods. 1999. Vol. 18, № 4. P. 459-464.

RIGHTS & PERMISSIONS

Eco-Vector